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时间:2017-07-03 10:22来源:未知 作者:北京pk拾赛车注册 点击:

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  平邑甜茶小孢子母细胞减数分裂的观察与研究

  李素芬I,张付雷2

  (1.聊城大学生命科学学院,山东聊城252000,2.聊城大学药学院,山东聊城252000)

  摘要:平邑甜茶为天然三倍体植物…,是苹果重要的乔化砧木。文章对平邑甜茶小孢子母细胞减数分裂进行观察,进一步研究其可育性,为种质资源的创新及研究高倍性育种奠定基础。

  关键词:平邑甜茶;减数分裂;小孢子母细胞

  平邑甜茶为湖北海棠的一个变种,具有非常强的兼性无融合生殖能力脚,其无融合生殖率超过95%,是目前苹果生产中已被广泛应用的乔化砧木之一。林盛华等报道平邑甜茶为3倍体植物,染色体数为2n-3X-51。减数分裂是真核细胞中的一种特殊类型的细胞分裂方式。减数分裂的意义在于性母细胞经过减数分裂后,各自形成的配子所含染色体数目减少到母细胞的一半,再经过受精作用形成合子,使染色体数目又恢复到体细胞的染色体数目。传统的遗传学理论认为,奇数多倍体常常是高度不育的,然而近年来许多学者研究证明三倍体植物也具有一定的育性。

  1材料与方法

  1.1材料

  1.1.1平邑甜茶本试验选取了聊城大学西校区的l棵平邑甜茶进行小孢子母细胞减数分裂染色体行为的观察与分析。

  1.1.2用具与试剂准备普通光学显微镜、镊子、解剖针、培养皿、载玻片、盖玻片、滤纸、擦镜纸、卡诺固定液(甲醇:冰醋酸=3:1,V/V》、保存液(70%的乙醇)、改良品红染色液等,其他试剂均为分析纯。

  1.2方法

  1.2.1材料的获取每天8:00、10:00、12:00、14:00、16:00时取处于减数分裂时期的平邑甜茶大小花蕾,立即放入新配置的卡诺固定液中固定24 h,然后转入保存液中,4℃冰箱保存备用。

  1.2.2小孢子母细胞减数分裂制片及观察小孢子母细胞减数分裂的观察采用花药压片法制作装片。取花蕾置于培养皿上,将花药取出放在滤纸上,吸除固定液,转移到载玻片上,加3滴改良品红染色液,用镊子捣碎花药挤出花粉母细胞,除去残渣。染色10 min后,加盖玻片,在普通光学显微镜下对平邑甜茶减数分裂过程中的细线期、偶线期、粗线期、双线期、中期I、后期I、末期I、前期Ⅱ、中期Ⅱ、后期Ⅱ、末期Ⅱ等时期进行观察拍照(见图1-11)。

  2注意事项

  2.1 准确地获取试验材料

  准确地获取试验材料是平邑甜茶小孢子母细胞减数分裂制片成功的基础。平邑甜茶春季开花,此时天气比较冷,所以,摘取花蕾的时间应该在晴朗天气的上午、中午温度较高的时间。此时,小孢子母细胞减数分裂较活跃,制片时容易获得较多的分裂相同,可提高制片效率。

  2.2准确地掌握花蕾的形态指标

  为能获得优质的可供分析的天然三倍体平邑甜茶小孢子母细胞减数分裂染色体变化和进一步提高制片效率,必须要准确地掌握花蕾的形态指标忉。因为平邑甜茶的花蕾大小、花药颜色都随着小孢子减数分裂的变化而变化。

  3结果与分析

  天然三倍体平邑甜茶的小孢子母细胞的减数分裂过程基本同步,其雄配子的各个发育时期同其花蕾的大小、花药颜色存在着一定的相关性。有研究表明,减数分裂期I持续时间占减数分裂过程的大部分‘”。天然三倍体平邑甜茶也符合该规律,且其小孢子母细胞处于四分孢子时期的时间较长,终变期的发育时间较短。因此,研究平邑甜茶终变期染色体配对及构型时,所取花蕾横径的大小是关键,只有取合适大小的花蕾才能得到较多的终变期分裂相。

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